ضریب همبستگی معنی داری
50 641/0 000/0

نمودار 4-14: ارزیابی تاثیر کیفی داروی مترونیدازول بر باکتری های احیا کننده سولفات جدا شده از گروههای سنی


ب : آزمون ضریب همبستگی
از بین 50 نفر از افرادی که مورد بررسی قرار گرفتند میزان ضریب همبستگی توافقی c 707/0 ومقدار معناداری 000/0 ، بنابراین بازهم فرض صفر در سطح 05/0 رد می شود و نشان دهنده ارتباط مستقیم و قوی بین تاثیر داروی مترونیدازول و سن می باشد. هرچه سن بالاتر رود تاثیر دارو بیشتر می باشد (جدول 4-16).
جدول 4-16: ضریب همبستگی متغیرهای سن و تاثیر داروی مترونیدازول
سن افراد
مترونیدازول فراوانی همبستگی توافقی c
ضریب همبستگی معنی داری
50 707/0 000/0
4-4- نتایج آزمایش PCR
4-4-1 تأیید استخراج DNA
الکتروفورز DNA استخراج شده از باکتری هدف، نشان دهنده ایجاد یک باند مشخص از DNA ژنومی به همراه یک باند احتمالی از DNA پلاسمیدی بود (شکل1).

شکل 4-1: تصویر الکتروفورز حاصل از DNA استخراج شده از باکتری. ستون 1) سایز مارکر 1kb plus، ستون 2) DNA ژنومی و DNA پلاسمیدی.
4-4-2 تأیید PCR ژن16S rRNA
الکتروفورز محصول PCR با ایجاد باند خالص 1494 جفت بازی نشان دهنده تکثیر صحیح ژن16S rRNA بود (شکل 2).

شکل 4-2: تصویر الکتروفورز حاصل از تکثیر ژن 16S rRNA باکتری .ستون 1) کنترل مثبت، ستون 2) کنترل منفی، ستون 3) سایز مارکر 1kb plus، ستون 4) باند 1494 جفت بازی نشان دهنده تکثیر صحیح ژن 16S rRNA در باکتری هدف.
4-4-3 توالی تعیین ترادف شده قطعه 16S rRNA
در این تحقیق قرار داشتن تمام نمونههای مورد آزمایش در خانواده کمپلکس دسولفوویبریو مورد تایید قرار گرفت.
توالی بدست آمده برای این سویه در زیر آمده است. بالاترین همسانی (95 درصد) این سویه پس از بلاست کردن با جنس و گونه Desulfovibrio piger تطابق دارد.
ACGTGGATAATCTGCCTCTATGATGGGGATAACAGTTGGAAACGACTGCTAATACCGAATACGCTCATGATGAACTTTGTGAGGAAAGGTGGCCTCTGCTTGCAAGCTATCGCATAGAGATGAGTCCGCGTCCCATTAGCTAGTTGGTGGGGTAACGGCCTACCAAGGCAACGATGGGTAGCCGATCTGAGAGGATGATCGGCCACACTGGAACTGAAACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCGCAATGGGCGAAAGCCTGACGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGAAGGTCTTCGGATCGTAAACCTCTGTCAGAAGGGAAGAAACTAGGGTGTTCTAATCATCATCCTACTGACGGTACCTTCAAAGGAAGCACCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATCACTGGGCGTAAAGCGCACGTAGGCTGTTATGTAAGTCAGGGGTGAAAGCCCACGGCTCAACCGTGGAACTGCCCTTGATACTGCACGACTCGAATCCGGGAGAGGGTGGCGGAATTCCAGGTGTAGGAGTGAAATCCGTAGATATCTGGAGGAACATCAGTGGCGAAGGCGGCCACCTGGACCGGTATTGACGCTGAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGGATGCTAGATGTCGGGATGTATGTCTCGGTGTCGTAGTTAACGCGTTAAGCATCCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGGCTGAAACTCAAAGAAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGTATGTGGTTTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTAGGTTTGACATCTGGGGAACCCTCCCGAAAATGAGGGGTGCCCTTCGGGGAGCCCCAAGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCCTATGCATAGTTGCCAGCAAGTAAAGTTGGGCACTCTATGCAGACTGCCCGGGTTAACCGGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACACCTAGGGCTACACACGTACTACAATGGCACGCACAAAGGGCAGCGATACCGTGAGGTGGAGCCAATCCCAAAAAACGTGTCCCAGTCCGGATTGCAGTCT
توالی تعیین شده قطعه 16S rRNA
4-4-4 آنالیز فیلوژنتیکی
برای ترسیم درخت فیلوژنتیکی از نرم افزار MEGA v.5.2 و آنالیز NJ (Neighbor-joining)، UPGMA و ML استفاده شد.